核酸提取仪提取的方法有哪些?
1. 煮沸裂解法。此法一般用于DNA的手工提取。染色体DNA比质粒DNA分子大很多,且染色体DNA为线状分子,而质粒DNA为共价闭合环装分子;当加热处理DNA溶液时,线状染色体DNA容易发生变性,共价闭合的质粒DNA在冷却时即恢复其天然构象;变性染色体DNA片段与变性蛋白质和细胞碎片结合形成沉淀,而复性的超螺旋质粒DNA分子则以溶解状态存在液相中,从而可通过离心将两者分开。
2.主要是使用两种不同的有机溶剂交替抽提将蛋白去除。用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与DNA的联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶,同时苯酚抑制了DNase的降解作用,蛋白质分子溶于酚相,而DNA溶于水相。
3.高盐沉淀法是酚氯仿抽提方法的一个变种,利用RNP和DNP在电解溶液中溶解度不同,将二者分离。
4.阴离子去污剂法。用SDS或二甲苯酸钠等去污剂使蛋白质变性,可以直接从生物材料中提取DNA。由于细胞中DNA与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合,同时阴离子去污剂能够破坏这种价键,所以常用阴离子去污剂提取DNA。
5.离心柱纯化。通过特殊硅基质吸附材料,能够特定吸附DNA,而RNA和蛋白质顺利通过,然后利用高盐低PH结合核酸,低盐高PH值洗脱,来分离纯化核酸。
6.磁珠法提取。磁珠法利用了磁性颗粒活性基团在一定条件下可与核酸结合和解离的原理,先使用细胞裂解液裂解细胞,带有活性基团的磁性颗粒可特异性吸附从细胞中游离出来的核酸分子,而样品中的其他干扰物则很好的移除了,在磁场作用下,磁性颗粒与液体分开完成,再用洗脱液洗脱即可得到纯净的DNA,获得质量较高的核酸模板。
上述主要介绍了核酸提取的一些方法,可随着实际的需求,结合核酸提取仪设备http://www.pl999.com/class.php?anclss=2&nclass=415的应用之后,不仅提高了检测的速度,同时检测的准确也提升了。除了这些优势之外,还能发挥哪些优势呢?
普朗医疗生产的一款PL-48核酸自动提取仪采用全自动化方式,与传统离心方式的手动操作比较,其核酸提取过程更简单,速度快,提取率高,同时在设备的操作方便,这款核酸提取仪采用彩色触摸显示屏,图形化、中英文界面,简单易用,无需外接计算机,无需特殊培训。